宜都公共资源交易中心:BrdU染色方法--1

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双标的protocol:
漂浮切片法
1)甲酰胺+4*SSC(1:1) 65℃煮片2h
2)PBS洗1次5分钟
3)加2M HCl,37℃,30分钟
4)加0.1M硼酸,PH8.5,10分钟
5)PBS洗5分钟*2次
6)滴加正常山羊血清封闭液，室温30分钟
7)吸去封闭液,滴加Ⅰ抗(rat anti-brdu 1:200;mouse anti-neun 1:500),4℃过夜
8)PBS洗5次每次5分钟。
9)滴加二抗(cy3 labeled goat-rat 1:200;FITC labeled goat-mouse 1:50),25℃20分钟。
10)PBC洗5次每次5分钟。
11)刷片、镜检。
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