邹胜 深交所:实验一 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（必修一P18）

来源：百度文库 编辑：中财网 时间：2024/04/29 23:25:45

实验一  检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（必修一P18）

一．实验目的：用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质

二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。

1．可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu 2O沉淀。如：

葡萄糖+ Cu ( OH)2   葡萄糖酸 + Cu 2O↓（砖红色）+ H 2O，

即Cu ( OH ) 2被还原成Cu 2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。

2．脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）。淀粉遇碘变蓝色。

3．蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。）

三．实验材料

1．做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，易于观察。）

2．做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3~4小时（也可用蓖麻种子）。

3．做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。

四、实验试剂

斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/mL NaOH溶液和B液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液）、体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水

五、方法步骤：

（一）可溶性糖的鉴定

操 作方 法  注 意 问 题  解 释

1. 制备组织样液。（去皮、切块、研磨、过滤）    苹果或梨组织液必须临时制备。       因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。

2. 取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。           

3. 向试管内注入1mL     新制的斐林试剂，振荡。    应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂；

切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。       斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu ( OH ) 2在70~900C下分解成黑色CuO和水；甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无     Cu ( OH ) 2生成。

4. 试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：浅蓝色 →棕色 → 砖红色（沉淀）       最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者。也可  用酒精灯对试管直接加热。       防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤；缩短实验时间。

 

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