那些年酷匠网小说赵磊:中草药对复方新诺明在大菱鲆体内残留消除的影响

张海珍 ，一，李 健 ，王 群 2，刘  淇 ，周一兵
(1．大连水产学院 生命科学与技术学院，辽宁 大连 116023；2．中国水产科学研究院 黄海水产研究所农业部海洋渔业资源可持续
利用重点开放实验室，山东 青岛 266071)
摘 要：采用高效液相色谱法研究了复方新诺明在大菱鲆体内的残留消除规律，探讨了饲料中添加中草药对其残 留消除的影响。
健康大菱鲆随机分成 2组，对照组和试验组连续 5 d投喂复方新诺明药饵 ，从第 6d起对照组投喂不含药物的空白饵料，试验组投
喂中药三黄散药饵 ，连续投喂 1个月。定期取样 ，测定复方新诺明残留情况。结果表明，在(10±2)℃水温下，两种主要成分磺胺甲基异
嗯唑和甲氧苄啶在大菱鲆血清、肌肉、肝脏中的消除半衰期如下：对照组为 z  血清7．86 d和 9．30 d、  肌肉8．42 d和 17．46 d、  肝
10．93 d和 20．63 d；试验组为  m清7．54 d和 8．76 d、  肌肉7．42 d和 16．1 1 d,T1 肝脏10．40 d和 l8．63 d。以可食性组织肌肉为残留
靶组织，磺胺甲基异嗯唑和甲氧苄啶消除到最高残留限量 (0．01 g·mL- 和 0．05[zg·mL )以下，对照组需要 61 d和41 d，试验组需
要 46 d和 26 d，表明中药三黄散对复方新诺明在大菱鲆体内的消除具有一定的促进作用。
关键词：复方新诺明；大菱鲆 ；中草药；残留
中图分类号：X592  文献标识码：A  文章编号：1672—2043(2008)05—2096—05
Effect of Chinese Herbal Medicine on Residue Elimination of Compound Sulfamethoxazole in Turbot(Scoph—
thatmus maxiraus)
ZHANG Hai-zhen ，LI Jian2,WANG Qun2,LIU Qi。，ZHOU Yi-bing
(1．CoUege of Lifo Sciences and Bioteehnology，Dalian Fisheries University，Dalian 1 16023，China；2．Yellow Sea Fisheries Research Insti-
tute，Chinese Academy of Fishery Sciences，Qingdgo 266071，China)
Abstract：The tissues distribution，residue depletion of compound suffamethoxazole and the influence of Chinese herbal medicine were in-
vestigated during multiple dosing in turbot at(10±2)。C seawater．The healthy turbots were fed a medicated diet cant aining 2 500 mg·kg-
compound sulfamethoxazole，twice daily for 5 days．Th en the turbots were divided into two groups with different experimental diets．The con—
trol group was fed a non—medicated diet，and the test group was fed a medicated diet containing 3 000 mg·kg一。Chinese herbal medicine for
one month．Serum，muscle and liver were sampled at different times and analyzed for sulfamethoxazole (SMZ)and trimethoprin (TMP)by
high-performance liquid chromatography(HPLC)．The resuhs showed that the residual time of TMP in turbot was longer than SMZ．In serum，
muscle and liver,the elimination half-lives of SMZ and TMP in the control group were 7．86 d and 9．30 d，8．42 d and 17．46 d，10．93 d and
20．63 d，and in the test group were 7．54 d and 8．76 d，7．42 d and 16．1 1 d，10．40 d and 18．63 d，respectively．The withdrawal period of SMZ
and TMP were 61 d and 41 d in the control group，and 46 d and 26 d in the test group，respectively，when the concentrations in muscle fell
below the maximum residue limits (MRLs)of 0．O1 p,g·mL～and 0．05 g·mL～．These results indicated that Chinese herbal medicine could
promote elimination of compound sulfamethox~zole in turbot．
Keywords：compound sulfamethoxazole；turbot(Scophthatmus maximus)；Chinese herbal medicine；residue
复方新诺明是磺胺类药物与其增效剂的复方制  破坏人的造血系统，引起人的肾脏损害等[31。部分国家
剂，在大菱鲆弧菌性疾病的治疗中广泛应用【 一，但随  已限制其使用，并对其残留作出明确规定。以日本肯
着使用的深人，磺胺类药物的副作用逐渐被发现，如  定列表的要求最为严格，两种主要成分磺胺甲基异嗯 唑和 甲氧苄 啶的最高残留限量分别为 0．01 g·mL
和 0．05 g·mL 。而在我国复方新诺明是允许使用
的水产药物 ，最高残留限量分别为 0．1 g·mL 和
0．05 Ixg·mL l 5l。为使我国水产品出口不受技术贸易壁
垒的限制 ，必须严格控制残留量。另外，研究表明磺胺
类药物在动物体 内的残留时间较长 ，10℃水温下长
达 60 d以上l 6、7l。因此，如何使水产品中的残留药物尽
快消除，确保质量安全，引起水产界的广泛关注。
中草药是种“绿色鱼药”，药源广、成本低，且具有
增强机体免疫力的作用。中西药结合在水产动物疾病
防治方面已有广泛应用，但利用药物间的相互作用，
改变药物在体 内代谢情况的报道还鲜见。本文选择具
有清热解毒作用的中药三黄散与复方新诺明联用，通
过对磺胺药物的残留检测，探讨三黄散对复方新诺明
在大菱鲆体内消除的影响。为指导合理用药 ，减少水
质污染 ，加速药物消除，确保食品安全提供参考数据。
l 材料与方法
1．1试验材料
1．1．1药品与试剂
磺胺 甲基异嗯唑(Sulfamethoxazole，SMZ)原粉 ，
含量 98％，甲氧苄啶(Trimethoprin，TMP)原粉 ，含量
98％，由青岛华阳制药有限责任公司生产，二者比例
4：1组成本试验用的复方新诺明；磺胺甲基异嗯唑和
甲氧苄啶标准品，含量分别为 99．0％和 99．5％，中国
兽药监察所生产；中草药主要成分：三黄散+芳草多
维，成都芳草药业有限公司生产 ；无水硫酸钠、二氯甲
烷、乙酸铵、正己烷均为分析纯；乙腈、甲醇为色谱纯。
1．1．2仪器
Agilentll00型高效液相色谱仪；Agilentll00型紫
外吸收检测器；数据处理系统，WindowsNT4．0惠普工
作站；氮吹仪：青岛生化仪器厂生产。
1．1．3试验动物
健康大菱鲆 ，体重(450~32)g，饲养于中国水产
科学研究院黄海水产研究所海阳试验基地，检测无复
方新诺明残留。水温为(1O±2)℃，充气 ，流水 ，试验
前暂养 2周 ，投喂大菱鲆配合饲料，正式试验前饥饿
24 h。
1．2试验方法
1．2．1试验设计
大菱鲆是冷水性海水鱼类 ，7～22℃水温下可生
长，弧菌性疾病在苗期及养成期均有发生 ，实际生产
中常采用口服药饵的方法进行疾病防治闻。为使本试验结果更具实际指导意义，采用生产上普遍使用的口
服药饵法，结合实际生产用药量(50～100 mg·kg 鱼体
重·d～，2次·d )进行试验设计。
将试验用健康大菱鲆随机分成 2组，对照组和试
验组。每组鱼分别饲养于两个 PVC桶内，两组投喂相
同的复方新诺明药饵 ，药物含量为 2 500 mg·kg 饲
料，每 13 2次，连续 5 d。从第 6 d起对照组投喂不含
药物的空白饲料 ，试验组投喂三黄散药饵，药物含量
为 3 000 mg·kg 饲料，连续 1个月。日投饲量与鱼体
重的质量分数为 2％～3％，根据鱼摄食情况及时调整
投饲量。并于停喂复方新诺明药饵后的 1、2．4、8、12、
16、22、28、36、44、54、64、74、84、94、104、114、124 d取
样 (试验组于第 4 d开始取样)，每一时间点取五尾
鱼。取样方法：用 1 mL无菌注射器从尾静脉处采血 5
mL，放入离心管中，5 000 r·min～，离心取血清，于一20℃
冰箱保存。同时取大菱鲆肌肉和肝脏样品，于一20 clC
冰箱保存。
1．2．2样品的前处理和色谱条件
准确称取 l g组织(肌肉，肝脏)或吸取 l mL血清，
加入少许无水硫酸钠，再加入 2 mL二氯甲烷，16 000
r·min～，匀浆 10 S，再用 3 mL二氯 甲烷清洗刀头，合
并两次提取液，振荡 l min，5 000 r·min 离心 10 min，
吸取有机层 ，剩余残渣加入 5 mL二氯甲烷二次提取，
振荡 1 min，5 000 r·rain 离心 10 min。取有机层与第
一
次提取液合并，在 40℃恒温水浴下氮气吹干，残渣
用 l mL流动相溶解，加入 l mL正己烷去脂肪 ，下层液
过 0．22 m的微孔滤膜，过滤后的液体可进行高效液
相色谱测定。
色谱条件 ：色谱柱 ，Agilent TC一18柱 ，(4．6~250
mm，填料粒度 5 I-Lm)；流动相，0．4％的乙酸铵／乙~=8o／
20(V／V)；紫外检测器，波长 240 nm；柱温 30℃；流速
1 mL·min ；进样量 20 L。
2 结果与分析
2．1线性范围与最低检测限
准确称取 0．010 0 g磺胺 甲基异嗯唑 (SMZ)和
0．010 0 g甲氧苄啶(TMP)标准品溶于 100 mL流动相
中，配成 100 g·mL。的母液 ，临用前再依次稀释成
20、l0、5、1、0．5、0．2、0．1、0．05、0．02、0．O1 Ixg·mL 的标
准溶液，进行 HPLC测定，以峰面积为横坐标，浓度为
纵坐标建立标准曲线 ，相关系数 r分别为 0．999 6和
0．999 2。结果表明 SMZ和 TMP在 0．01～20 g·mL
浓度范围内线性关系良好。以引起二倍基线噪音的药 量为最低检测限，本法最低检测限为 0．01 g·mL- 。
2．2回收率与精密度
空 白组 织 按 5个浓度梯度 (0．05、0．1、1、10、20
g·mL )加入标准液，然后按样品处理方法处理；将
另一组未加入标准液的空白组织亦经相同处理，然后
再加入标准液。按照公式进行计算 ：回收率  )=(处
理前加入标准液样品的测定值／处理后加入标准液样
品的测定值 )xlO0％。将上述样品于 1 d内分别重复
进样 5次和分 5 d测定，计算各浓度水平响应值峰面
卜1山I望、 器
1   O   0   0   0 
积的变异2  系数1   ，8以  此6  衡4量  定2  量O方  法的精密度。结果表
明 SMZ和 TMP在各组织中的 回收率在 76．59％～
92．62％之间，变异系数在 1．70％～2．50％之间(表 1)。
Et内精密度为 2．79％±1．01％，日间精密度为 3．53％
±1．37％，符合药物残留分析要求。
2．3复方新诺明在大菱鲆组织中的残留
试验过程中，试验组与空白组在死亡率、健康状
况方面没有显著性差异，说明中药三黄散对大菱鲆的
生长无不利影响。
给药后复方新诺明在大菱鲆各组织中消除较陕，
随时间延长其消除速度逐渐减慢，整个消除过程呈负
指数函数变化。不同组织内药物随时间变化趋势如图
2～7所示。由图可知，两主要成分 SMZ和 TMP在试验
组肝脏和肌肉中的浓度均低于对照组，在 64 d的采
样点，两组织中均检测不到药物残留。血清中药物浓
度与对照组相比差异不显著。  3 讨论
3．1复方新诺 明在大菱鲆体内的残留消除规律
复方新诺明在大菱鲆各组织中的消除速率不同，
表现为血清>肌肉>肝脏。但相同组织中SMZ的消除
速率远大于 TMP，这与大部分磺胺药与其增效剂在
鱼体内的代谢特点相一致。Samuelsen的研究显示磺
胺二甲基嘧啶(Sulfadimidine SDD)和 TMP在大西洋
鳙鲽肌肉和肝脏中的  分别为 1．4、2．0、4．2、4．7 d同。他的另一项研究结果表明：磺胺问二甲氧嘧啶(Sul—
fadimethoxine SDM)和 TMP的类 似 物 甲藜 嘧 啶
(Ormethoprim 0MP)在大西洋鲑血液 、肌肉、肝脏 、肾
脏 4种组织 中的  分别为 0．63、0．62、2．6、2．0 d和
2．6、6．9、3．9、17 d『9l。对比两组数据可以发现 ，SDD和
SDM的消除速率均比其增效剂 TMP或 OMP快，说明
磺胺药比其增效剂更易消除。
由于水温较低 (10~2)oc，SMZ和 TMP在各组织
中的消除半衰期都明显延长[10．11]。鱼类是变温动物，水
温变化对药物在鱼体 内的吸收代谢有较大影响 。
Herman and Degurse报道在 7．7℃与 14℃两个不同水
温条件下研究磺胺甲基嘧啶在虹鳟体内的代谢时也
发现水温降低，消除半衰期显著延长㈣。
3．2中草药对复方新诺明在大菱鲆体内残留消除的
影响
中药三黄散其主要成分：大黄、黄岑、黄柏。本试
验将其应用于水产动物中以促进残留药物的消除正
是利用了三黄散具有泻火解毒、清热燥湿、护肝利胆 安和五脏的作用n4)。另外，药物之间的相互作用可能
是促进复方新诺明消除的又一影响因素。药物相互作
用按药代动力学分类可分为：影响药物的吸收、分布、
代谢和排泄。其中影响药物的代谢指的是药物进入机
体后主要经肝药酶代谢，对药酶活性有影响的药物，
一
类为药酶诱导剂，一类为药酶抑制剂，药酶诱导剂
能使与之伍用的其他药物代谢加速 【瑚。SMZ和 TMP
对 CYP450有抑制作用【垌，而黄岑苷能够显著诱导小
鼠CYP450含量及活性【堋，大黄能够增强小鼠CYP3A
活性【 ，所以可能是因为三黄散增强了药物代谢酶的
活性，从而使复方新诺明的代谢加快。但关于中药对
鱼类肝药酶影响的报道还很少见，故是否由于此原因
造成复方新诺明消除加快还需进一步研究证实。影响
药物的排泄指的是药物肾小球、肾小管同一部位竞争
排泄，如阿司匹林、消炎痛可显著延长青霉素的半衰
期，酸化或碱化体液促进药物的排泄 。磺胺类药物
为酸性化合物 ，易溶于碱性化合物，所以碱性药物与
磺胺类药物合用，可以碱化体液，促进药物的排泄 。
三黄散中含多种碱性物质 ，在体内可碱化体液，从而
能够促进 SMZ的消除。
通过合理选用中草药与西药联合使用 ，能够促进
动物体内残留药物尽快消除，缩短休药期 ，确保食品
质量安全，且不会对环境造成污染。因此该方向的研
究将得到越来越广泛的应用。
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