交通安全展馆:(四)植物细胞工程

来源:百度文库 编辑:中财网 时间:2024/05/12 15:58:08
一、细胞工程的概念
  细胞工程是指以应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过某种工程学的手段,以细胞或细胞器为基本单位,在体外条件下进行培养和扩大繁殖,按照人们的意愿改变细胞内遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术,分为植物细胞工程技术、动物细胞工程技术两大类。此外,微生物细胞工程技术也在迅速兴起 。

  二、植物细胞工程
  植物细胞工程包括植物组织培养和植物体细胞杂交。

  ㈠植物细胞工程的原理—细胞全能性
  1、细胞全能性的概念:生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能,细胞的这种特性叫做细胞的全能性。
  2、细胞具有全能性的原因:生物的每个细胞都含有该物种所特有的全套遗传信息,都有发育成为完整个体所必需的全部基因。
  3、生物体内细胞没有表现出全能性而是分化为不同细胞的原因:基因在不同时空的选择性表达。
  4、不同细胞的全能性大小的比较:
    ⑴受精卵是全能性最高的细胞;
    ⑵生殖细胞和早期胚胎细胞具有较高的潜在全能性;
    ⑶体细胞保留有细胞全能性,离体植物细胞在一定条件下表现出全能性;动物细胞核可表现出全能性
    ⑷融合形成杂种细胞能够扩增或发育成杂种植株;
  5、植物细胞全能性表现的条件:离体、营养条件、激素、其它外界条件

  ㈡植物组织培养
  1、概念:植物组织培养是在无菌和人为控制营养、光照、温度和湿度等条件下,培养植物组织器官,进而从中分化和培育整体植株的生物技术。

  2、培养流程:
  
  3、实例:非洲紫罗兰的组织培养
  ⑴选择合适的外植体。用于植物组织培养的植物体细胞、组织或器官,统称为外植体。外植体要进行去除病原菌或杂菌的消毒处理。
  ⑵制作诱导外植体脱分化的培养基,培养基的主要成分包括水、大量和微量元素、蔗糖、维生素、有机添加物、植物激素(生长素、细胞分裂素)、琼脂等。
  ⑶在无菌条件下,将外植体接种到适当的培养基上,并放在光照和温度适宜的条件下培养。脱分化后的外植体细胞或组织,通过细胞分裂形成愈伤组织。
  ⑷将愈伤组织转接到适当的培养基上经过人工诱导,产生根、芽等器官,发育成完整的植物体。

  4、植物组织培养技术的重要意义
  ⑴植物组织培养技术是探究植物科学理论的重要手段
  ⑵短时间内快速大量繁殖
  ⑶培养无病毒感染植株
  ⑷获得细胞的代谢物(生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂)
  ⑸生产人工种子
  ⑹转基因植物的培养

  三、植物体细胞杂交
  将两种植物的体细胞融合成一个杂种细胞,通过组织培养技术将杂种细胞培育成新植物体
  1、原理:细胞膜的流动性,植物细胞的全能性

  2、基本步骤:
  ⑴选择种子根、子叶、下胚轴、胚细胞、花粉母细胞、幼叶等并消毒处理;
  ⑵在温和条件下用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,分离和获得原生质体;
  ⑶用物理方法(离心、振荡、电击)或化学诱导剂(如聚乙二醇PEG)促使两种体细胞的原生质体融合;
  ⑷利用植物组织培养技术将杂种细胞培育成杂种植株。

  流程图如下:

  3、植物体细胞杂交技术成果
  番茄-马铃薯
  烟草—海岛烟草
  白菜—甘蓝
  胡萝卜—羊角芹等杂种植株

  4、植物体细胞杂交的意义
  克服远缘杂交不亲和的障碍,扩大可用于杂交的亲本范围

  【拓展知识解析】
  1、植物组织培养过程中细胞的变化:植物组织培养过程中,被用于接种的外植体的细胞通常是已经特化了的成熟细胞,没有分裂能力。在培养基中外源激素的刺激和诱导下,这些离体的细胞代谢活动增强,开始恢复分裂能力,不断产生新细胞,从而形成无规则愈伤组织。如果要保持愈伤组织的旺盛生长,需要将愈伤组织再次切割成小块,转移到新的培养基上,以避免培养过程中养分不足或一些有毒物质的积累。愈伤组织的再分化的发生也需要一定的条件,其中激素的种类与比例是很重要的影响因素,愈伤组织被转移到合适的诱导培养基上,其细胞就可以进行再分化先形成新的器官原基,再逐步形成芽或根。这种分化方式叫做不定芽方式。有些植物的愈伤组织中的薄壁细胞可以直接产生类似于胚的结构,这种再分化方式叫做胚状体方式,胚状体具有生根发芽能力。

  2、无毒苗的培养: 植物在生长过程中几乎都要遭受到病毒不同程度的危害,有的种类甚至同时受到数种病毒病的危害,尤其是很多园艺植物靠无性生殖方法来增殖,如果遭受病毒病,代代相传,越染越重,影响植株的性状,甚至会造成极严重的后果。病毒在细胞内增殖,可以随着输导组织到达植物的各个部位。但是植物的茎尖处输导组织分布较少,而且分生组织处于旺盛的分裂时期,不容易被病毒侵染,采用微茎尖培养方法可得到无病毒苗。组织培养无病毒苗的方法已在很多作物的常规生产上得到应用,如马铃薯,甘薯,草莓,苹果,香石竹,菊花等。

  3、植物的组织培养技术的分类:通常我们所说的广义的组织培养,是指通过无菌操作分离植物体的一部分(即外植体),接种到培养基上,在人工控制的条件进行培养,使其生成完整的植株。组织培养按培养对象可分为植株培养、器官培养、组织培养、细胞培养和原生质体培养等。狭义的组织培养是指以植物各部分组织或愈伤组织为外植体,如茎尖分生组织、形成层、木质部、韧皮部、表皮组织、胚乳组织和薄壁组织等等。 

  【例题解析】
  1、关于细胞全能性的说法正确的是:
  A 从理论上讲,生物体的体细胞都具有全能性
  B 未脱离植物体的幼叶,在适当的条件下能表现出全能性
  C 在个体发育的不同时期,由于细胞内基因发生变化,导致细胞不能表现出全能性
  D 脱离了植株的芽,一定能表现出全能性

  解析:全能性是指生物体细胞发育为完整个体的潜能,没有必要的条件如离体、激素的刺激等细胞并不能将这种潜能表现出来。答案为A。

  2.以下不能说明细胞全能性的实验是
  A 胡萝卜韧皮部细胞培育出植株
  B 紫色糯性玉米种子培育出植株
  C 转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株
  D 番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株

  解析:玉米种子含有能生根发芽的胚结构,由种子获得植株的过程不能体现出细胞的全能性。答案为B。

  3.甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化。目前生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗,以保证该品种的品质和产量水平。这种通过分生组织离体培养获得种苗的过程不涉及
  A 有丝分裂    B 分化    C 减数分裂    D 全能性

  解析:利用植物组织培养技术获得完整植物体,其基本原理是细胞全能性,离体组织细胞脱分化和再分化过程细胞的分裂均为有丝分裂,不涉及减数分裂。
  答案为C。

  4.在不损伤高等植物细胞内部结构的情况下,下列物质适用于除去细胞壁的是
  A 蛋白酶  B 盐酸   C 纤维素酶    D 淀粉酶

  解析:细胞壁的成分主要是纤维素,用纤维素酶可以去除细胞壁并保证细胞的活性。答案为C。

  5.紫草素是紫草细胞的代谢产物,可作为生产治疗烫伤药物的原料。用组织培养技术可以在生物反应器中通过培养紫草细胞生产紫草素。下图记录了生物发生器中紫草细胞产量、紫草素产量随培养时间发生的变化。

  ⑴在生产前,需先加入紫草细胞作为反应器中的“种子”。这些“种子”是应用组织培养技术,将紫草叶肉细胞经过___________过程而获得的。这项技术的理论基础是___________。
 
  ⑵从图中可以看出:反应器中紫草细胞的生长呈现___________规律;影响紫草素产量的因素是___________和___________。
  ⑶在培养过程中,要不断通入无菌空气并进行搅拌的目的是___________和___________。

  解析:参考答案
  ⑴脱分化(或脱分化形成愈伤组织)  细胞的全能性
  ⑵S型增长   细胞数量   细胞所处的生长期
  ⑶保证氧气供应充足   使细胞与培养液充分接触

  6.下图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答:
  ⑴步骤①是______________________,最常用的方法是______________________。
  ⑵步骤②一般常用的化学试剂是______________________,目的是______________________。
  ⑶在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中,运用的技术手段是______________________,其中步骤④是细胞__________________过程,步骤⑤是细胞的____________________过程。
  ⑷植物体细胞杂交的目的是获得新的杂种植株。使______________________能够在新的植物体上有所表现,其根本原因是_______________________________。
  ⑸若远源杂交亲本A和B都是二倍体,则杂种植株为__________________倍体。
  ⑹从理论上讲,杂种植株的育性为___________________________________。(可育或不育)若运用传统有性杂交方法能否实现?________________________。并说明理由____________________________________________。因此,这项研究对于培养作物新品种方面的重大意义在于_________________________________。
  ⑺利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种过程中,遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律?为什么?______________________。

  解析:参考答案⑴去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体;酶解法
  ⑵聚乙二醇(PEG);诱导不同植物体细胞的原生质体融合
  ⑶植物组织培养;脱分化;再分化
  ⑷远缘杂交亲本的遗传特征;杂种植株获得双亲的遗传物质
  ⑸四
  ⑹可育,不能  因为不同种生物之间存在生殖隔离;克服远缘杂交不亲和的障碍,大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围
  ⑺不遵循。因为在生物进行有性生殖的过程中,才遵循孟德尔的遗传规律,而植物体细胞杂交育种的过程不属于有性生殖。