即有分期官网登陆:DNA复制、转录、翻译以及PCR技术比较

来源:百度文库 编辑:中财网 时间:2024/04/30 22:18:55
DNA复制(细胞内复制)
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PCR技术(体外DNA复制技术)
概念
DNA复制是指DNA双链在细胞分裂以前进行的复制过程,复制的结果是一条双链变成两条一样的双链(如果复制过程正常的话),每条双链都与原来的双链一样
DNA分子首先解开双链以DNA的一条链为模板按照碱基互补配对原则合成RNA的过程
以mRNA为模板,以tRNA为运载工具.合成具有一定氨基酸顺序的蛋白质的过程K|S|5U
PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。
场所
细胞核、线粒体、叶绿体
细胞核、线粒体、叶绿体K|S|5U
细胞质(核糖体)K|S|5U
体外
原料
4种游离脱氧核苷酸
4种游离核糖核苷酸K|S|5U
20种游离氨基酸K|S|5U
4种游离脱氧核苷酸
模板
DNA分子中的两条链
DNA中的一条链K|S|5U
mRNA K|S|5U
目的基因(或目的基因的两条链)

解旋酶、DNA聚合酶等(DNA连接酶)K|S|5U(
解旋酶、RNA聚合酶等
不要求氨基酰tRNA合成酶、氨肽酶等K|S|5U
耐热DNA聚合酶(Taq酶)
能量
ATP
ATP
ATP
不需要ATP,能量来自外界加热
过程
1、解旋:在解旋酶作用下,利用ATP释放的能量解开双螺旋;2、在DNA聚合酶的作用下,按照碱基互补配对原则,把游离的脱氧核苷酸连接到模板链上,并使脱氧核苷酸之间过磷酸二酯键连接;3、沿着模板链不断延伸,最终形成两个一模一样的DNA分子。
1、解旋:在解旋酶作用下,利用ATP释放的能量解开双螺旋;2、以解开的一条DNA链为模板,按碱基互补配对原则,游离的核糖核苷酸与脱氧核苷酸配对,3、核糖核苷酸间通过磷酸二酯键连接成RNA(mRNA,tRNA,rRNA )
mRNA从核孔进入细胞质,与核糖体结合,从起始密码子(AUG)开始翻译。tRNA一端携带氨基酸进入核糖体.另一端的反密码子与mRNA上的密码子配对,两氨基酸间形成肽键。核糖体继续沿mRNA 移动,每次移动一个密码子,至终止密码结束,肽链形成
1、变性:即加热至高温使得目的基因的双链打开(解旋,但不需要解旋酶);2、退火 (复性):降温使得解开的两条链分别与引物结合;3、延伸:在Taq酶的作用下,按碱基互补配对原则,脱氧核苷酸之间过磷酸二酯键连接成新链。重复上述三步,就能获得大量的目的基因。
模板
去向
复制后,模板链与新形成的子链形成双螺旋结构
转录后,模板链与非模板链重新形成双螺旋结构
分解成核糖核苷酸
扩增后,模板链与新合成的子链形成具有双螺旋结构的目的基因
特点
1、边解旋边复制;2、半保留复制
边解旋边转录
一条mRNA可与多个核糖体结合翻译成多条相同的多肽链
1、半保留复制;2、快速大量复制
产物
形成两个完整的DNA分子
三种单链RNA
蛋白质(多肽链)
短时间内形成大量的目的基因
二、在基因过程的各种检测和鉴定:
1、标记基因:为了检测目的基因(目的基因表达载体)是否导入受体细胞;    2、用DNA分子杂交法:检测目的基因是否插到染色体DNA上(工具:基因探针)
3、用DNA分子杂交法:检测目的基因是否转录出mRNA(工具:基因探针);  4、用抗原—抗体杂交法:检测mRNA是否翻译出蛋白质;
5、鉴定:个体水平鉴定:比如抗虫实验。