be doing something:l融合标签技术概述

来源:百度文库 编辑:中财网 时间:2024/05/08 14:54:22
融合标签技术概述融合标签技术的发展最初是为了简化蛋白质的纯化,即通过重组蛋白质所含融合标签同固相介质中配体的特异相互作用,实现重组蛋白质的亲和纯化陋哪“目。目前,随着多种融合标签系统的研究和发展,融合标签技术也得到了更为广泛的应用,包括重组蛋白质的纯化、目的蛋白质的检测和定向固定、体内生物事件的可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性及稳定性。融合标签的相对分子质量、来源、生理生化特性各有不同陋191。亲和融合标签既可以是小分子多肽片段如多聚组氨酸标签,也可以是整个功能蛋白质如麦芽糖结合蛋白(MBP)。这些融合标签的作用机制包括了酶与底物、细菌受体与血清蛋白、多聚组氨酸与金属离子、抗原与抗体等f1¨q。一些高表达的蛋白质和分子伴侣如SUM0和NusA作为融合标签连接到目的蛋白质上时,可以提高重组融合蛋白的表达量和可溶性,避免和减少包涵体的产生,提高目标蛋白质的产量嗍。如果融合标签的作用类型为抗原和抗体,此类融合标签也被称为表位标签(epitopetags)。由于抗体对抗原的识别和结合有很高的特异性,而表位标签通常为小分子多肽片段,对重组融合蛋白的结构和功能影响较小,可以结合免疫检测技术用于追踪和定位目的蛋白,进行蛋白质及蛋白质复合体的结构功能相关性研究哪52.11。荧光蛋白如绿色荧光蛋白(GYP)受激发时可以发出荧光,能够利用仪器定性和定量检测。有利于对含有融合荧光蛋白标签的重组蛋白的表达、追踪、定位及相关结构功能研究刚础l。