歌词文件格式:碱裂解法提质粒

来源:百度文库 编辑:中财网 时间:2024/05/06 05:53:41
基因克隆中质粒DNA的小量制备?
A9:常见的质粒DNA提取方法有简易一步提取法、碱裂解法和煮沸法。最常用的为碱裂解法,原理是:在pH 12.0-12.6碱性环境中,线性的大分子量细菌染色体DNA变性,而共价闭环质粒(CC)DNA仍为自然状态。将pH值调至中性并有高盐浓度存在的条件下,染色体DNA之间交联形成不溶性网状结构。大部分染色体DNA和蛋白质在去污剂SDS的作用下形成沉淀,而质粒DNA仍为可溶状态。通过离心,将可去除大部分细胞碎片、染色体DNA、RNA及蛋白质,质粒DNA尚在上清中,再用乙醇沉淀回收质粒DNA。目前,SunShineBio的商品化质粒小量提取试剂盒可以帮助您回收高质量、高效率的质粒。